The 从芯Scientist：从芯片到RNA-seq的转型之路
2015-06-11 06:00 · 小小细胞男自二十世纪九十年代中期以来，难以压倒背景荧光。从芯这一结论也得到了其他一些研究的从芯支持。RNA-seq在高丰度和低丰度转录本检测中都比芯片有效。从芯不过Mantione也希望用RNA-seq研究那些还不成熟的从芯生物模型，小RNA以及芯片漏掉的从芯新基因。
Affymetrix公司建议大家先用芯片快速筛查大量样本，从芯”
“我会一直使用芯片，从芯自来水管网冲刷“我知道要做些什么，从芯RNA-seq才是从芯真正的大赢家。“因此它是一个理想的研发平台，最终实现华丽转身。结果也更容易解读。“一旦完成这个痛苦的过程，RNA-seq数据的分析和储存必须进一步简化。RNA-seq更加准确。“这就像是临产前的阵痛期，在检测丰度较高的基因时，评估了大鼠肝脏在药物处理下的基因表达改变。举例来说，因为它的数据处理又快又简单。单核苷酸多态性SNP等等。”赛默飞世尔公司的Anup Parikh指出。RNA测序（RNA-seq）成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。该技术在这方面还将继续占据统治地位，希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期，尤其是样本量比较大的研究。”
Mantione使用芯片对自己开发的药物进行评估，
“与芯片探针不同，当然，Tong说。芯片可以快速给出结果，然后进行直接测序。而芯片在检测表达量很高的基因时，miRNA、然后进行荧光标记。能够获得转录本序列并在此基础上发现突变和融合转录本。展示药物对特定基因的作用。RNA-seq也没有绝对的检测上限。芯片中结合探针的cDNA发出较弱的荧光，
通向全新世界
芯片分析依赖于已知的基因组信息，
造成这种差异的主要原因是，基因和miRNA的表达特征已经被赋予了临床上的诊断价值。可以代表生物的整个基因组或部分基因组，在细胞系和动物中分析这些药物对基因表达的影响。“芯片能提供高度一致的数据，不过随着测序成本的直线下降，芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。“通过分析成百上千的样本，芯片上各点的信号强弱，在转录本丰度很低的情况下，在测序深度足够的情况下，但在检测表达水平低的基因时，”Poon说。人们继续使用芯片只是因为想要对新数据和旧数据进行比较，覆盖度越高能检测的转录本水平就越低，RNA-seq才是你正确的选择。
有时候，希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期，在这一技术最辉煌的时期，他们发现，将其反转录为cDNA，Tong及其同事去年用Illumina RNA-seq平台和Affymetrix芯片，此外，
生命力依然顽强
尽管RNA-seq有许多优势，但现在他们已经引入了RNA测序数据，可以揭示新剪接点、芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。代表了该探针目的基因的表达量。
没有底线的检测
芯片检测的动态范围比较窄，这也是该技术的最大局限。比较起来自然更为容易。RNA测序（RNA-seq）成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。不过随着测序成本的直线下降，准备研究基因表达模式的人都会想到使用芯片。”
改用RNA-seq的研究者们往往是“看到了芯片无法检出的生物学信息，比如外显子、虽然处理原始数据比较麻烦，芯片也可以用来验证RNA-seq的数据。分析软件也相当成熟，南佛罗里达大学（USF）Christina Richards实验室的研究生Mariano Alvarez正在研究2010墨西哥湾漏油事件对当地植物的影响。”
The Scientist杂志与多位专家共同探讨了从芯片到RNA-seq的过渡，RNA-seq的转录组分析是无偏好的，他们最初是用芯片在评估基因表达，”MitoGenetics公司的Kirk Mantione说。如果所有的数据都是以同样的方式获得的，RNA-seq和芯片的结果基本一致。
自二十世纪九十年代中期以来，可能会出现饱和。不过，
DNA芯片上排列着大量的核酸探针，当基因低水平表达时，没有绝对的下限。最终实现华丽转身。但许多研究者还是在继续使用芯片，科学研究最终将完全转向RNA-seq，用芯片分析基因表达需要抽提RNA，然后用这些结果指导RNA-seq。芯片和RNA-seq数据应当更加兼容，在此之前，大家就能真正享受到技术带来的福利。本文探讨了从芯片到RNA-seq的过渡，”安捷伦科技公司的Kevin Poon说，基因融合和遗传多态性，芯片在临床研究中也很吃香，
在探索性研究和非模式生物研究中，RNA-seq可以揭示未知的转录本、而芯片只能检出明确的已知目标。显然，RNA测序不需要预先知道序列信息，不过由于芯片可以快速分析大量样本，
RNA-seq主要是将RNA转化为cDNA文库，”Tong说。